武汉赛科成科技以细胞培养技术为核心，致力于为全球提供一次性产品，生物反应器，配液储液系统及相关的技术服务，与您11月2-3日相约成都细胞生物产业大会！
嵌合抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor T cell，CAR-T）免疫疗法是将患者或异体供者体内分离的T细胞通过基因工程技术进行改造，使其表达嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR），从而特异性识别并杀伤肿瘤细胞的一种过继细胞疗法。CAR-T是近年来癌症免疫治疗领域的重大突破之一，在血液系统恶性肿瘤的治疗中体现了巨大优势，具有广阔的发展前景。
CAR-T免疫疗法在血液系统恶性肿瘤治疗中取得了突破性进展。目前美国食品药品管理局（Food and Drug Administration，FDA）共批准了四款靶向CD19的CAR-T细胞产品，这些产品主要用于治疗儿童和青年复发/难治性急性B细胞淋巴细胞白血病（B-cell acute lymphoblastic leukemia，B-ALL）和成人特定类型的B细胞非霍奇金淋巴瘤（B cell non-Hodgkin lymphoma，B-NHL）。随着大量有关CAR-T临床研究的开展，针对不同靶点的有关CAR-T细胞还有望应用于B-NHL、多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）、慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia，CLL）、急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）、T细胞淋巴瘤及实体瘤等领域。
CAR-T 细胞免疫疗法流程大致可以分为五步：首先，需要采集患者的外周血并提取免疫 T 细胞；其次，利用基因工程技术给 T 细胞加入一个既能识别肿瘤细胞，又能激活 T 细胞靶向杀死肿瘤细胞的嵌合抗体，使 T 细胞变身为 CAR-T 细胞；再次，将经过基因改造的 T 细胞进行体外培养，使其达到符合治疗要求的细胞数量（一般一个病人需要几十亿，甚至上百亿个 CAR-T 细胞）；第四，对 CAR-T 细胞进行质量检测；最后，把扩增好的高质量 CAR-T 细胞回输到患者体内，靶向杀死癌细胞，同时避免对正常组织的损伤。与用药请外援不同，CAR-T 细胞免疫疗法其实是改善装备武装自己从而使敌人致命的方法。本文中利用武汉赛科成公司的摆床反应器扩增CAR-T细胞。
上图为武汉赛科成公司SKC600系列摆床反应器
实验材料
细胞：T细胞（同源）；
试剂：培养基（Lonza）、IL-2（四环生物）；
耗材：1 L（工作体积）培养袋（由武汉赛科成提供），适量一次性储液袋（由武汉赛科成提供），T25、T75、T150方瓶（细胞扩增）；
设备: SKC600 10L 摆床反应器（由武汉赛科成提供）。
实验步骤
1. 种细胞培养
1.1 细胞培养条件：恒温37℃，CO2浓度 5%，相对饱和湿度95%，细胞培养基pH值7.2-7.4。
1.2 根据细胞计数调密度2×106/ml加入方瓶中培养，混匀放入CO2培养箱培养2小时。
1.3 取出培养瓶，轻摇，使沉降于底部的悬浮细胞浮起，培养瓶倾斜30度角，移液管吸取培养基转入离心管中，少许培养基清洗培养瓶，将悬浮细胞全部收集，混匀计数。
1.4 根据细胞计数调整细胞浓度1.2×106/ml接种培养瓶中，加CD3/CD28磁珠，按细胞与磁珠比例为1:3（加之前磁珠用培养基洗涤3次，去除保存液），加入IL-2（100U/ml），混匀放入CO2培养箱中培养。
1.5 次日细胞培养1天，调整细胞密度至0.6×106/ml，加入病毒（MOI为1-5）混匀放入CO2培养箱中培养。
1.6 细胞培养3天，细胞计数补加培养基和IL-2（100U/ml）细胞密度调整至0.6×106/ml继续培养。
1.7 细胞培养5天去磁珠，细胞混匀转离心管中，在磁力架上去除磁珠。
2. CAR-T 细胞反应器培养：
2.1将细胞密度调整为0.5×106/ml，培养体积400ml，同时加入IL-2（100U/ml），摆床反应器转速设置为6转，角度为6°；
2.2 根据细胞代谢情况补加培养基至终体积(1000ml)；
2.3 细胞培养至5-6天将反应器转速调整至8转，角度6°，同时开始灌流（0.3VVL）；
2.4 随着细胞密度提高再培养调整灌流体积（0.5VVL）；
2.5 当细胞密度达到1×107/ml以上时将反应器转速调整至12转，角度6°，同时增加灌流体积（1VVL）；
2.6 在细胞密度达到2-3×107/ml时，即可以收获。
实验结论
从以上几组实验结果来看，使用摆床反应器，可以有效的扩增CAR-T细胞满足治疗需求，用摆床反应器扩增CAR-T细胞是一种较好的选择。
「武汉赛科成科技有限公司简介」
武汉赛科成科技有限公司成立于2016年，是一家集研发，生产，销售为一体的设备和耗材的高新技术企业，以细胞培养技术为核心，致力于为全球提供一次性产品，生物反应器，配液储液系统及相关的技术服务。
公司拥有自己的细胞培养实验室，可以提供细胞培养技术服务和生物反应器维护保养及认证服务。
公司先后申请包括获得专利43项，荣获高新技术企业和武汉科技“小巨人”企业荣誉称号，并通过ISO9001质量体系认证。
公司拥有自主品牌CEKG®，专注于为疫苗、细胞及基因治疗、抗体、体外诊断等行业提供细胞培养的设备和耗材，经过团队不懈努力，公司已成为行业先进的高新技术企业。
武汉赛科成科技即将参与于渝江饭店5楼举办的第五届CBIC细胞生物产业大会，展位号为C51,欢迎业内人士前往展位参观交流，洽谈合作！
