CHOK1细胞 CHOK1细胞是实验中非常常用的一个细胞株，在生物制药中使用也非常广泛。该细胞株培养条件简单，贴壁强度适中，比较容易转染，很适合用它来研究一般哺乳动物基因的功能。 来源：Cricetulusgriseus（中国仓鼠）卵巢 形态：表皮细胞 生长特性：贴壁 注释：CHOK1由CHO衍生而来，CHO是T。T。Puck在1957年从一只成年中国仓鼠卵巢获得的。 培养液：HamsF12K（含2mML谷氨酰胺，1。5gLNaHCO3），10胎牛血清。 传代：吸去培养液。用0。25（wv）Trypsin0。53mMEDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加23毫升TrypsinEDTA，放在37培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加68毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：4到1：8为宜，传代期间培养液更换12次） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 293细胞 293细胞比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株：293T17的转染效率更高，成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。 293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失，从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中，就需要让细胞沉降几天时间，因为大量细胞会漂浮在培养液里。 来源：人体肾脏 形态：上皮细胞 生长特性：贴壁 注释：该细胞含腺病毒5DNA。 培养液：MEM（含2mML谷氨酰胺和EarlesBSS，1。5gLNaHCO3，0。1mM非必需氨基酸，1。0mM丙酮酸钠），10马血清（热灭活）。 传代：吸去培养液。用0。25（wv）Trypsin0。53mMEDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加23毫升TrypsinEDTA，放在37培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加68毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：2到1：4为宜，传代期间培养液23天更换1次） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 vero细胞 Vero细胞被成功的用来培养狂犬病疫苗、乙脑疫苗等多种疫苗，在非典期间又为研究冠状病毒做出贡献，在医药研究种广泛应用。 来源：非洲绿猴肾细胞 形态：上皮细胞 生长特性：贴壁 注释：该细胞是日本千叶大学的Y。Yasumura和Y。Kawakita于1962年3月27日从一只正常的成年非洲绿猴肾组织培养出来的。 培养液：MEM（含2mML谷氨酰胺和EarlesBSS，1。5gLNaHCO3，0。1mM非必需氨基酸，1。0mM丙酮酸钠），10胎牛血清 传代：吸去培养液。用0。25（wv）Trypsin0。53mMEDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加23毫升TrypsinEDTA，放在37培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加68毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：3至1：6为宜，传代期间培养液每周更换23次） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 NIH3T3细胞 NIH3T3细胞在实验室常用来做转染及基因表达的研究。易感病毒有鼠肉瘤病毒和鼠白血病毒。 来源：Musmusculus（小家鼠）胚胎 形态：成纤维细胞样 生长特性：贴壁 注释：为得到适合转染得细胞株，NIH3T3细胞至少连续克隆过5次。NIH3T3细胞容易转染DNA，鼠痘病毒阴性。 培养液：DMEM（含4mML谷氨酰胺、4。5gL葡萄糖、1。5gL碳酸氢钠），10小牛血清 传代：吸去培养液。（不要让细胞长满培养器皿，长满80为宜）用0。25（wv）Trypsin0。53mMEDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加23毫升TrypsinEDTA，放在37培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加68毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以35x103cm2为宜，传代期间培养液每周更换2次） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 PC12细胞 PC12细胞是一个常用的神经细胞株。 来源：Rattusnorvegicus（褐家鼠）肾上腺嗜铬细胞瘤（一种交感神经系统的肿瘤） 形态：多角型细胞 生长特性：贴壁较松，容易成团 注释：PC12细胞株来源于一种可移植的鼠嗜铬细胞瘤，该细胞对神经生长因子（NGF）有可逆的神经元显形反应，该细胞不合成肾上腺素。 培养液：HamsF12K（含2mML谷氨酰胺，1。5gLNaHCO3）15马血清2。5胎牛血清。 传代：吸去培养液。加入新的培养液，用吸管吹下细胞或用手拍打培养瓶或刮下细胞到培养液中，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：4为宜，传代期间23天更换培养液） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 Hela细胞 Hela细胞是在所有细胞株中最著名的。它来源于美国的HelenLane，她1951年死于子宫颈癌。但源自她的肿瘤的细胞却在世界各地的实验室中得到广泛的使用。 来源：人宫颈癌 形态：上皮细胞 生长特性：贴壁 注释：Hela细胞显角蛋白免疫沉淀染色阳性，包含HPV18序列，有正常水平的pRB和p53的低水平表达。 培养液：MEM（含2mML谷氨酰胺和EarlesBSS，1。5gLNaHCO3，0。1mM非必需氨基酸，1。0mM丙酮酸钠），10胎牛血清 传代：吸去培养液。用0。25（wv）Trypsin0。53mMEDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶活性）。加23毫升TrypeinEDTA，放37培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加68毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：2到1：6为宜，每周传代23次） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 BHK21细胞 BHK细胞是指幼年叙利亚地鼠肾细胞（BabyHamsterSyrianKidney），1961年建株。原始的细胞株是成纤维细胞，贴壁依赖性。1963年获得单细胞克隆细胞。后经无数次传代后细胞可悬浮生长，它广泛用于增殖各种病毒，生产兽用疫苗。最常用的是BHK21的一个亚克隆细胞，即克隆13或C13。 来源：叙利亚仓鼠肾细胞 形态：纤维原细胞 生长特性：贴壁 注释：这个细胞来自于一只出生一天的新生仓鼠，随后被改造成一个易于作表达的宿主细胞株。 培养液：MEM（含2mML谷氨酰胺和EarlesBSS，1。5gLNaHCO3，0。1mM非必需氨基酸，1。0mM丙酮酸钠）10胎牛血清 传代：吸去培养液。用0。25（wv）Trypsin0。03mMEDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶活性）。加23毫升TrypeinEDTA，放37培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加68毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：2到1：10为宜，每周传代12次） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 HepG2细胞 HepG2细胞来源于一个15岁白人的肝癌组织。该细胞分泌多种血浆蛋白：清蛋白、2巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等。该细胞能大容量培养，乙肝表面抗原阴性，对G418有抗性，对人生长激素有刺激反应。 来源：人肝癌细胞 形态：上皮细胞 生长特性：贴壁 注释：该细胞表达3羟基3甲基戊二酸辅酶A还原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶。该细胞在有百草枯（英文名：gramoxone）的环境下过氧化氢酶mRNA表达增加，ApoAImRNA表达减少。 培养液：MEM（含2mML谷氨酰胺和EarlesBSS，1。5gLNaHCO3，0。1mM非必需氨基酸，1。0mM丙酮酸钠）10胎牛血清。 传代：吸去培养液。用0。25（wv）Trypsin0。53mMEDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加23毫升TrypsinEDTA，放在37培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加68毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：4至1：6为宜，传代期间培养液每周更换2次） 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 Sf9细胞 Sf9细胞常在Baculovirus（杆状病毒）表达系统中用作宿主细胞，来表达外源蛋白。 来源：Spodopterafrugiperda（草地夜蛾）卵巢细胞 形态：上皮细胞 生长特性：贴壁 注释：Sf9细胞是由G。E。Smith和C。L。Cherry在1983年从细胞株IPLBSF21AE得来的一个克隆。IPLBSF21AE是1977年由Vaughn等从草地夜蛾蛹的卵巢组织得到的。 培养液：TNMFH培养液，照说明配好GracesAntheraea培养液，每升培养液加3。3g酵母粉和3。3g乳白蛋白水解物，用1MKOH调pH到6。26。4过滤除菌，4保存。完整培养液在使用前加入10热灭活的胎牛血清。 传代：用吸液管吹洗细胞使其悬浮，或用手从侧面拍打细胞培养瓶（当用大细胞培养瓶时）重悬细胞。当用来接种的细胞重悬前就有很多细胞漂浮，要吸掉漂浮细胞及旧培养液，加入新培养液重悬细胞。按合适比例传代细胞到新培养器皿中。（以1：5或更多为宜，每23天传代一次）28培养（不用CO2培养箱）。 冻存：95培养液5DMSO冻存于液氮。 以上为培养基和血清常规使用种类和比例，仅供参考。 其中： BME：BasalMediumEagle DMEM：Dulbecco’sModifiedEagleMedium FBS：FetalBovineSerum IMDM：Iscove’sModifiedDulbecco’sMedium MEM：MinimumEssentialMedium NEAA：NonEssentialAminoAcidsSolution
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